飼料粗(cu)脂(zhi)肪(fang)的測(ce)定(ding)方法(fa) 脂肪(fang)測(ce)定(ding)儀

飼料粗(cu)脂(zhi)肪(fang)的測(ce)定(ding)方法(fa) 脂肪(fang)測(ce)定(ding)儀

【教學目(mu)標】
1.學會(hui)各(ge)種(zhong)飼料樣本的粗(cu)脂(zhi)肪(fang)的方法(fa)。
2.學會(hui)儀(yi)器的使(shi)用(yong)
【教學重(zhong)點(dian)】樣本的測(ce)定(ding)方法(fa)。
【教學方法(fa)】操作指(zhi)導
【課時(shi)分配】6學時(shi)
【原理(li)】索氏(shi)脂(zhi)肪(fang)提(ti)取(qu)器中(zhong)用(yong)乙(yi)mi提(ti)取(qu)試樣，稱提(ti)取(qu)物(wu)的重(zhong)量(liang)，除脂肪(fang)外(wai)還(hai)有(you)有(you)機(ji)酸(suan)，磷脂(zhi)、脂(zhi)溶(rong)性(xing)Vit，葉綠(lv)素等(deng)，因而(er)測(ce)定(ding)結(jie)果稱粗脂肪(fang)或(huo)乙(yi)mi提(ti)取(qu)物(wu)。
【分(fen)析(xi)步(bu)驟(zhou)】
1）仲裁(cai)法(fa)使(shi)用(yong)索氏(shi)脂(zhi)肪(fang)提(ti)取(qu)器測(ce)定(ding)。
索氏(shi)提(ti)取(qu)器應(ying)幹(gan)燥無水(shui)。抽提(ti)瓶(ping)(內有(you)沸石數(shu)粒(li))在(zai)105℃±2℃烘箱中(zhong)烘幹(gan)60min，幹(gan)燥器中(zhong)冷(leng)卻30min，稱重。再烘幹(gan)30min，同(tong)樣冷(leng)卻稱重，兩(liang)次重(zhong)量之(zhi)差(cha)小於0.0008g為恒重。
稱取試樣1～5g(準確(que)至0.0002g)，於濾紙(zhi)筒中(zhong)，或用(yong)濾紙(zhi)包好(hao)，放入(ru)105℃±2℃烘箱中(zhong)，烘幹(gan)120min(或稱測(ce)水(shui)分後(hou)的幹(gan)試樣，折算(suan)成風(feng)幹(gan)樣重)，濾(lv)紙(zhi)筒應(ying)高(gao)於提(ti)取(qu)器虹(hong)吸(xi)管(guan)的高(gao)度，濾紙(zhi)包長度應以(yi)可(ke)全部(bu)浸(jin)泡於乙(yi)mi中(zhong)為準。將(jiang)濾紙(zhi)筒或(huo)包放(fang)入抽提(ti)管(guan)，在(zai)抽提(ti)瓶(ping)中(zhong)加無水(shui)乙(yi)mi60～100mL，在(zai)60～75℃的水(shui)浴(用(yong)蒸(zheng)餾(liu)水(shui))上加熱(re)，使(shi)乙(yi)mi回(hui)流，控(kong)制(zhi)乙(yi)mi回(hui)流次數(shu)為(wei)每(mei)小時(shi)約(yue)10次，共(gong)回(hui)流約(yue)50次(含油高(gao)的試樣約(yue)70次)或(huo)檢(jian)查抽提(ti)管(guan)流出(chu)的乙(yi)mi揮(hui)發(fa)後(hou)不(bu)留(liu)下油跡(ji)為抽提(ti)終(zhong)點(dian)。
取(qu)出(chu)試樣，仍用(yong)原提(ti)取(qu)器回(hui)收(shou)乙(yi)mi直(zhi)至抽提(ti)瓶(ping)全部(bu)收(shou)完(wan)，取下抽提(ti)瓶(ping)，在(zai)水(shui)浴上(shang)蒸(zheng)去(qu)殘(can)余(yu)乙(yi)mi。擦凈瓶(ping)外壁(bi)。將抽提(ti)瓶(ping)放入105℃±2℃烘箱中(zhong)烘幹(gan)120min，幹(gan)燥器中(zhong)冷(leng)卻30min稱重，再烘幹(gan)30min，同(tong)樣冷(leng)卻稱重，兩(liang)次重(zhong)量之(zhi)差(cha)小於O.OOlg為恒重。
2）結(jie)果計(ji)算


式(shi)中(zhong)：m ——風(feng)幹(gan)試樣重量(liang)，g。
m1 ——已(yi)恒重的抽提(ti)瓶(ping)重量，g。
m2——己(ji)恒重的盛(sheng)有(you)脂肪(fang)的抽提(ti)瓶(ping)重量，g。
3）推(tui)薦(jian)法(fa)
⑴魯氏(shi)殘(can)留法(fa)
①操作步(bu)驟(zhou)
a.將脫(tuo)脂(zhi)濾(lv)紙(zhi)裁(cai)成10×10cm2大(da)小，疊成壹(yi)邊不(bu)封(feng)口的紙(zhi)包，用(yong)鉛筆(bi)編(bian)號，按順序排(pai)列(lie)於培養皿上，置於105℃土(tu)2℃烘箱中(zhong)烘2h，取出放(fang)於幹(gan)燥器中(zhong)冷(leng)卻至室溫(wen)，分別(bie)放入(ru)同(tong)壹(yi)稱量瓶(ping)中(zhong)稱重(m0，g)。
b.將2～5g風(feng)幹(gan)樣品(通過(guo)40目(mu)篩)用(yong)小藥匙小心裝(zhuang)入已(yi)經(jing)稱重的紙(zhi)包中(zhong)，封上(shang)包口(kou)。
按順序排(pai)列(lie)於培養皿中(zhong)。置於105℃±2℃烘箱中(zhong)烘3h，取出放(fang)入幹(gan)燥器中(zhong)冷(leng)卻至室溫(wen)，分別(bie)放入(ru)原稱量瓶(ping)中(zhong)，稱至恒重(m1，g)。將樣品包(bao)放入(ru)抽提(ti)管(guan)中(zhong)，倒入(ru)無水(shui)乙(yi)mi，使(shi)之(zhi)剛(gang)超(chao)過(guo)樣品包(bao)高(gao)度，浸(jin)泡過(guo)夜(ye)。然(ran)後將(jiang)浸(jin)泡過(guo)樣品的無水(shui)乙(yi)mi放(fang)入(ru)抽提(ti)瓶(ping)中(zhong)，再重(zhong)新向抽提(ti)管(guan)中(zhong)倒入(ru)無水(shui)乙(yi)mi，使(shi)之(zhi)浸(jin)沒樣品包(bao)。連接(jie)裝(zhuang)置，接(jie)通冷(leng)凝(ning)水(shui)，在(zai)70～80℃水(shui)浴鍋中(zhong)回(hui)流6～8h，回(hui)流速(su)度以(yi)每分(fen)鐘20mL左(zuo)右為(wei)宜(yi)。抽提(ti)完(wan)畢(bi)，取(qu)出(chu)樣品包(bao)，在(zai)通風(feng)處揮(hui)幹(gan)乙(yi)mi．剩余(yu)乙(yi)mi可(ke)進(jin)行(xing)回(hui)收(shou)。
c.將樣品包(bao)仍按原序(xu)號排(pai)列(lie)在(zai)培養皿中(zhong)，置於105℃±2℃烘箱中(zhong)烘2h，取出放(fang)入幹(gan)燥器中(zhong)冷(leng)卻至室溫(wen)，再將樣品包(bao)放原稱量瓶(ping)中(zhong)，稱至恒重(m2，g)。
②結(jie)果計(ji)算
粗脂(zhi)肪(fang)＝ m1－m2×100%
m1－m0
式(shi)中(zhong)，m0——濾紙(zhi)＋稱量瓶(ping)重（g）；
m1——提(ti)取(qu)前(qian)樣品包(bao)＋稱量瓶(ping)重（g）；
m2——提(ti)取(qu)後(hou)樣品包(bao)＋稱量瓶(ping)重（g）。
上述(shu)兩(liang)種(zhong)方法(fa)都是以(yi)乙(yi)mi為(wei)溶(rong)劑(ji)的提(ti)取(qu)方法(fa)，其優(you)點(dian)是(shi)具有(you)較好(hao)的準確(que)度和精密(mi)度，尤(you)其是(shi)測(ce)定(ding)粗脂肪(fang)含量(liang)在(zai)5%以(yi)下的樣品，用(yong)此(ci)法(fa)比較可(ke)靠(kao)。缺(que)點是(shi)費(fei)工(gong)費(fei)時(shi)，反復提(ti)取(qu)需(xu)8～16h；另(ling)外(wai)乙(yi)mi不(bu)能(neng)將樣品中(zhong)的全(quan)部(bu)脂(zhi)肪(fang)提(ti)盡。這(zhe)是因為(wei)部(bu)分(fen)脂(zhi)肪(fang)常(chang)與蛋白質或(huo)碳水(shui)化合(he)物等(deng)非(fei)脂肪(fang)成分(fen)結(jie)合(he)。成為(wei)結(jie)合(he)態脂(zhi)類，如(ru)脂(zhi)蛋白、糖脂、磷酯(zhi)等(deng)，同(tong)時(shi)樣品也是烘幹(gan)的，因乙(yi)mi難以(yi)滲入(ru)含水(shui)樣品的組(zu)織(zhi)內部(bu)。在(zai)烘幹(gan)樣品時(shi)，又(you)應考慮到脂肪(fang)在(zai)高(gao)溫(wen)下易(yi)被(bei)空(kong)氣(qi)氧(yang)化等情況。
⑵脂(zhi)肪(fang)測(ce)定(ding)儀
①操作步(bu)驟(zhou)
a.打開恒溫(wen)加熱(re)裝(zhuang)置開關(guan)，控(kong)制(zhi)工作溫(wen)度為75℃。
b.用(yong)萬分(fen)之(zhi)壹(yi)分析(xi)天平(ping)稱2g左右的樣品(準確(que)至0.0002g) (m1)，放入濾(lv)紙(zhi)筒內烘幹(gan)。
c.用(yong)套(tao)筒夾(jia)將6個濾紙(zhi)套(tao)筒裝(zhuang)入浸(jin)提(ti)冷(leng)凝(ning)管內，當(dang)確(que)信(xin)套(tao)筒已(yi)被(bei)磁鐵(tie)吸(xi)牢後(hou)取(qu)下套(tao)簡(jian)夾。
d.用(yong)分析(xi)天平(ping)稱浸(jin)提(ti)杯(bei)重(zhong)量(liang)(m2)，然(ran)後加入(ru)約(yue)50mL無水(shui)乙(yi)mi，用(yong)杯托將6個浸(jin)提(ti)杯(bei)放(fang)在(zai)加熱(re)板上，再(zai)將(jiang)冷(leng)凝(ning)管提(ti)升(sheng)機(ji)構(gou)搬(ban)下，使(shi)浸(jin)提(ti)懷(huai)與冷(leng)凝(ning)管連(lian)接(jie)好(hao)。
e.事(shi)先(xian)接(jie)通浸(jin)提(ti)冷(leng)凝(ning)管的冷(leng)卻水(shui)，將濾(lv)紙(zhi)筒置(zhi)於“沸騰"位置。冷(leng)凝(ning)管應(ying)有(you)良好的冷(leng)凝(ning)作用(yong)；
f.無水(shui)乙(yi)mi沸騰15min或30min(依樣品含油量而(er)異(yi))後，將濾(lv)紙(zhi)筒提(ti)升(sheng)到“沖(chong)洗(xi)"位置(zhi)，沖(chong)洗(xi)30min或45min。
g.沖(chong)洗(xi)結(jie)束後(hou)，關閉冷(leng)凝(ning)管旋(xuan)塞閥(fa)，回(hui)收(shou)乙(yi)mi。
h.松開冷(leng)凝(ning)管提(ti)升(sheng)機(ji)構(gou)，取下浸(jin)提(ti)杯(bei)，並(bing)放(fang)入(ru)烘箱烘幹(gan)。
i.在(zai)幹(gan)燥器中(zhong)冷(leng)卻浸(jin)提(ti)杯(bei)，然(ran)後用(yong)分析(xi)天平(ping)稱重(m3)。
j.按以(yi)下公(gong)式(shi)計(ji)算樣品中(zhong)粗脂(zhi)肪(fang)含量(liang)。
②測(ce)定(ding)結(jie)果的計(ji)算
粗脂(zhi)肪(fang)＝W3－W2×100%
W1
式(shi)中(zhong) ：W1——風(feng)幹(gan)試樣重量(liang)，g。
W2 ——已(yi)恒重的浸(jin)提(ti)杯(bei)重(zhong)量(liang)，g。
W3——己(ji)恒重的盛(sheng)有(you)脂肪(fang)的浸(jin)提(ti)杯(bei)重(zhong)量(liang)，g。
6.3.3.7 重(zhong)復性(xing)每(mei)個試樣取兩(liang)平(ping)行(xing)樣進(jin)行(xing)測(ce)定(ding)，以(yi)其算(suan)術平(ping)均值(zhi)為(wei)結(jie)果。粗(cu)脂(zhi)肪(fang)含量(liang)在(zai)10%以(yi)上(含10%)允許(xu)相對偏(pian)差為3%。粗脂肪(fang)含量(liang)在(zai)10%以(yi)下時(shi)，允許(xu)相對偏(pian)差為5%。
【實訓作業(ye)及思考題】
1.測(ce)定(ding)混合(he)飼料、配(pei)合(he)飼料、濃(nong)縮(suo)飼料或(huo)單壹(yi)飼料中(zhong)粗脂(zhi)肪(fang)的含量(liang)，並寫出(chu)實(shi)訓報告。
2.脂肪(fang)包(bao)的高(gao)度超過(guo)虹(hong)吸(xi)高(gao)度對測(ce)定(ding)結(jie)果有(you)何影響(xiang)？為(wei)什麽？
3.脂(zhi)肪(fang)測(ce)定(ding)儀對飼料脂(zhi)肪(fang)的測(ce)定(ding)有(you)何優點?
4.對測(ce)定(ding)Z後放入105℃±2℃烘箱中(zhong)需幹(gan)燥的包(bao)、瓶(ping)或杯有(you)何要求？
5.測(ce)定(ding)Z後包、瓶(ping)或杯在(zai)105℃±2℃烘箱內的幹(gan)燥時(shi)間(jian)為(wei)什麽不(bu)能(neng)過(guo)長?過(guo)長是否會影響(xiang)測(ce)定(ding)結(jie)果?